示差分光光度法又称差示分光光度法,是经典分光光度法的基础上派生出来的一种分光光度法。

示差分光光度法测的吸光度值与试液浓度减去参比溶液浓度所得的差值成正比。

示差分光光度法测定中,测定误差大小与参比溶液无关。

双波长分光光度法适合于对混浊试样的分析,可同时进行双、三组分测定。

双波长分光光度法只可用于样品溶液中单组分的测定。

单波长双光束分光光度计克服了单波长单光束分光光度计参比、试样两个比色皿的缺点,避免了两个吸收池而带来的误差。

显色反应时应按化学计量准确加入一定量的显色剂。

溶液的酸度对显色反应没有太大的影响。

由于温度对光的吸收及颜色的深浅都有影响,因此在绘制标准曲线和进行样品测定时,应使温度保持一致。

显色反应在室温下进行即可。

在比色分析,加入显色剂后,有色络合物立即生成,但放置后又逐渐退色,对这类反应应在显色后立即进行测定。

所有显色反应在显色剂加入后要立即进行比色测定。

有机溶剂常降低有色化合物的离解度,从而降低显色反应的灵敏度。

有机溶剂可能提高显色反应速度,影响有色配合物的溶解度和组成。

分光光度法的测量范围仅限于可见光区域内。